用氯化銫離心法純化噬菌體

1．在每毫升zui后的噬菌體懸液（例如來自實驗方案13．11）中，加入0．45 g氯化銫，充分混勻至溶解。
2．用吊桶式轉(zhuǎn)頭 （或與其相當(dāng)?shù)男吞枺?離心溶液，15℃17h，噬菌體將濃縮在組分1和組分2中（。組分1的濃度較高，但組分2的體積較大。用巴氏滴管或塑料注射器吸取這些組分。如果是*次使用本實驗方案，那么先收集所有條帶并分別對其檢測將是明智之舉。
3．將收獲的溶液對PBS透析過夜。
4．通過感染大腸桿菌DH5cF，或TGl滴定各個不同組分中噬菌體，并保存滴度zui高的組分。通常，噬菌體會集中在1個區(qū)帶內(nèi)，而較少的數(shù)量會分散在其他區(qū)帶（如果可見）。加入甘油至10％；按每份樣本1013個噬菌體等量分裝并儲存于-80℃。更進一步的質(zhì)量控制則可進行蛋白雜交印跡，采用抗標(biāo)簽抗體或抗pⅢ抗體。

用氯化銫純化噬菌粒。
離心后離心管外觀如圖示。噬菌體主要濃縮于碎片樣區(qū)帶（組分1）和其下的乳白色區(qū)帶（組分2）。兩條區(qū)帶均需收集

www.sxszyy.com