抗原結(jié)合到抗體微珠基質(zhì)層析柱上

將抗原結(jié)合到抗體微珠基質(zhì)上的zui簡(jiǎn)單方法是將微珠裝到一個(gè)層析柱內(nèi)，將抗原溶液流經(jīng)層析柱，當(dāng)抗原流經(jīng)層析柱時(shí)結(jié)合到抗體上而被固定，直到洗脫時(shí)才洗脫下來。這種方法的效率是根據(jù)抗原與固定的抗體之間的接觸時(shí)間決定的，所以抗原抗體之間的作用時(shí)間可以用低流速而延長。這種方法zui大一個(gè)問題就是某些蛋白非特異性結(jié)合到分離柱上，這些蛋白可以出現(xiàn)在洗脫液中，從而使純化效率降低。基質(zhì)本身和抗體基質(zhì)復(fù)合物具有與待檢抗原溶液中蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的表面活性。雖然這些反應(yīng)較正常的抗原—抗體反應(yīng)要弱得多...

淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎實(shí)驗(yàn)室診斷與結(jié)果分析

淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎（1ymphocyticchoriomeningitis）是由淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒引起的急性傳染病。臨床表現(xiàn)多樣，典型表現(xiàn)為急性無菌性腦膜炎，嚴(yán)重者可出現(xiàn)腦膜腦炎。該病一般為自限性，預(yù)后良好。[病因?qū)W]淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒屬沙粒病毒屬，為RNA病毒，是zui早發(fā)現(xiàn)與人類無菌性腦膜炎相關(guān)的病毒之一。病毒先侵入呼吸道上皮細(xì)胞繁殖，然后進(jìn)入血液循環(huán)致病毒血癥，此期可通過血腦脊液屏障而致腦膜、脈絡(luò)叢有淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤，腦實(shí)質(zhì)水腫等病變。[實(shí)驗(yàn)室診斷]...

狂犬病實(shí)驗(yàn)室診斷與結(jié)果分析

狂犬病（rabies）是狂犬病毒引起的傳染病。犬、貓、狼是狂犬病毒的主要儲(chǔ)存宿主。人被病犬（或病貓等）咬傷后，病畜唾液中的病毒經(jīng)傷口侵入人體，沿周圍神經(jīng)（主要是感覺神經(jīng)）至背根節(jié)經(jīng)脊髓人腦而致病。[病因?qū)W]狂犬病病毒是負(fù)鏈RNA病毒，屬彈狀病毒科的彈狀病毒屬。該病毒編碼兩種主要蛋白，一種為G蛋白，它是病毒包膜外突起的基本單位，誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體；另一種為病毒顆粒內(nèi)部的N蛋白，誘導(dǎo)補(bǔ)體結(jié)合抗體、熒光抗體等，根據(jù)狂犬病病毒N、G基因的遺傳差異，狂犬病病毒可分為6種基因型，其中1～4...

蛋白芯片技術(shù)的基本原理與技術(shù)的研究現(xiàn)狀

在多年的蛋白芯片技術(shù)的研究過程中，研究者為了尋找合適的物質(zhì)作為蛋白的載體進(jìn)行了不懈的探索。例如日本學(xué)者利用含有陽離子表面活性劑（HTAB）脂質(zhì)體作為載體，通過戊二醛作用使其與一種鐵蛋白包裹外殼的成分結(jié)合組裝制備成一種納米水平的裝配體，這種裝配體可以在適當(dāng)?shù)膒H條件下使鐵蛋白分子進(jìn)入并固定于包裹外殼內(nèi)面，形成蛋白質(zhì)的載體。有人利用某些固體表面或覆蓋上含有電解質(zhì)的薄膜作為載體，可以將膠體蛋白質(zhì)顆粒成分轉(zhuǎn)移至薄膜上形成蛋白芯片。Uetz等在分析啤酒酵母基因組序列全長度閱讀框架編碼各...

蛋白芯片技術(shù)的應(yīng)用研究存在的問題及應(yīng)用前景

Ge在蛋白質(zhì)的相互作用的研究中，采用了一種通用的蛋白質(zhì)芯片系統(tǒng)，該系統(tǒng)敏感有效，用途廣泛，可定量測(cè)定及重復(fù)使用，而且操作簡(jiǎn)易。Gavin等應(yīng)用蛋白芯片技術(shù)觀察代謝過程有關(guān)作用物和酶的相互作用關(guān)系。他們選擇3對(duì)蛋白激酶與作用物系統(tǒng)，即依賴3，，5，—磷酸蛋白激酶—Kemptide；酪蛋白激酶Ⅱ—蛋白質(zhì)磷酸酶抑制因子2和p42促有絲分裂劑激活蛋白（MAP）激酶（ErK2）—ElKl，首先將各系統(tǒng)的作用物按順序固定于3張BSA-NHS玻片上，分別在有核素7-s’PATP的環(huán)境中與不...

NDV的常規(guī)分離與鑒定新城疫

病毒分離是診斷NDzui為確切的一種方法，并且可以為感染的毒株定性。通常采用雞胚接種的方法分離NDV，也可用鴨胚、鵪鶉胚或雞胚成纖維細(xì)胞等。病毒分離時(shí)取患病雞的腦、脾、肺等組織的勻漿混合物，加抗生素處理后，接種于雞胚或其他禽類胚的尿囊腔或雞胚成纖維細(xì)胞中。組織樣品須反復(fù)凍融3次以上，以確保病毒分離的成功。病料接種雞胚后，一般培養(yǎng)36～96h雞胚發(fā)生死亡，可見胚體的頭、翅、頸、胸等處出血，尿囊液清朗，內(nèi)含大量病毒，呈現(xiàn)較高的血凝性。分離病毒時(shí)還應(yīng)結(jié)合相應(yīng)的血凝和血凝抑制試驗(yàn)等方...

單克隆抗體技術(shù)檢測(cè)新城疫

單克隆抗體僅僅識(shí)別一個(gè)抗原位點(diǎn)，用抗病毒蛋白的單克隆抗體就可以檢測(cè)出各種病毒毒株表面抗原之間的微小差異，從而通過抗原差異來研究病毒的變異并可對(duì)其分群歸類。20世紀(jì)80年代以來，國內(nèi)外很多實(shí)驗(yàn)室已制備出多株NDV單克隆抗體，并用其測(cè)知NDV有很多變種。Russell等在1983年zui早以Ulster2C弱毒株為抗原研制出針對(duì)新城疫病毒不同多肽成分的9株單克隆抗體，將新城疫病毒的毒株分為A—H8個(gè)群，同一群中的病毒與這些單抗的反應(yīng)譜相同，大多數(shù)具有共同的生物學(xué)和流行病學(xué)特征。隨...

檢測(cè)大腸桿菌的分子生物學(xué)方法

傳統(tǒng)的細(xì)菌分離、培養(yǎng)及生化反應(yīng)，已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足對(duì)各種病原微生物的診斷以及流行病學(xué)的研究。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是免疫學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)及計(jì)算機(jī)技術(shù)的不斷發(fā)展，新的微生物診斷技術(shù)和方法已廣泛被應(yīng)用。近來國內(nèi)外學(xué)者不斷努力，已創(chuàng)建不少快速、簡(jiǎn)便、特異、敏感、低耗且適用的微生物診斷方法，尤其是DNA探針和以PCR為代表的分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展及自動(dòng)化儀器的應(yīng)用已明顯加快了微生物檢驗(yàn)的速度，明顯提高了微生物的診斷水平。近年文獻(xiàn)表明，核糖分型不能用來鑒定EHEC0157：...